Internationale Vorschriften für die Prüfung von Saatgut

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1 Règles International Internationales Rules for pour Seed les Testing Essais de 2016 Semences Internationale Vorschriften für die Prüfung von Saatgut Méthodes validées pour analyse sanitaire des Validated Seed Health Testing Methods semences Validierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut 7 001b: Malz-Agar-Methode Méthode sur malt agar für pour den Nachweis la détection von 7-001b: Detection Alternaria dauci in Daucus d Alternaria dauci an sur Samen semences von Daucus de Daucus carota carota carota (carrot) seed by malt agar method (Möhre) (carotte) Inklusive Inclus Including les Änderungen changes changements and und editorial de redaktionelle règles corrections et Korrekturen adopted éditoriales at verabschiedet adoptées auf der lors Ordinary ordentlichen la General réunion Generalversammlung Meeting annuelle 2016, générale Tallinn, 2016, 2016, Estonia Tallinn, Estonie Estland Gültig Effectives ab from 1. au Januar 1er 1 January janvier

2 Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Internationale Règles Internationales Vorschriften International pour für les die Rules Essais Prüfung for de Seed von Semences Saatgut Testing Validierungsstudien Études Validation de reports validation Siehe Voir See Références. References. Literaturquellen. Les Copies copies Kopien are sont available sind disponibles erhältlich by au per secrétariat from de ISTA l ISTA Secretariat par courriel at durch ista.fice@ista.ch. das ISTA-Sekretariat. Kommentare, Merci Please d envoyer send comments, Empfehlungen les commentaires, suggestions oder Berichte suggestions or reports zu Problemen ou problems signalement relating de to this problèmes dieser method Methode sur to cette sind ISTA méthode bitte Seed an das Health au responsable ISTA Committee, Seed He- du betreffend alth ISTA c/o ISTA Committee Seed Secretariat. Health über Committee, die Adresse c/o des Secrétariat ISTA-Sekretariates de l ISTA. zu richten. Limitation Disclaimerde responsabilité Haftungsausschluss En Whilst dépit ISTA du soin has pris taken par care l ISTA to pour ensure assurer accuracy l exactitude des Obgleich méthodes methods and die et ISTA des informations mit Sorgfalt described auf contenues die in Richtigkeit this dans method la der descrip- in diesetion, Methodenbeschreibung des ISTA méthodes, shall not l ISTA liable décline angegebenen for any toute loss responsabilité or Methoden damage, pour und etc. In toute resulting for mationen perte from ou dommage, achtet, use haftet this etc., sie method. résultant nicht für de jeglichen l utilisation Verlust, de la Schaden présente méthode. etc., der aus der Verwendung dieser Methode resultiert. Sicherheitsmaßnahmen Sécurité Safety precautions Der Assurez-vous Ensure sichere you are Umgang de familiar connaître mit Gefahren les hazard risques im data et mikrobiologischen and prenez take les appropriate safety und de sécurité die precautions, Berücksichtigung appropriées. especially entsprechender Il est during supposé weighing Vorsichts- que out cette mesures Labor maßnahmen, méthode ingredients. est It pratiquée is insbesondere assumed dans that un während persons laboratoire der carrying de Herstellung microbiologie out this test der Kulturmedien, par are des in a personnes laboratory dem suitable familières Autoklavieren for des carrying principes und Auswiegen out de microbiological bonnes der pratiques procedures de laboratoire, sind and zu familiar gewährleisten. de bonnes pratiques principles Es wird de vorausgesetzt, microbiologie, Good Labo- Bestandteile, dass et ratory des diese Practice, techniques Arbeitsschritte Good d asepsie. Microbiological in einem Tous mikrobiologischen les Practice, déchets doivent and aseptic Labor être durch traités techniques. Mitarbeiter d une Dispose manière durchgeführt appropriée all waste werden, materials (par exemple die in mit an autoclavage, den appropriate Prinzipien désinfection) way der (e.g. Guten autoclaving, et Laborpraxis, selon des disinfection) règlements Guten Mikrobiologischen and locaux in accordance de sécurité. Praxis und local der health, sterilen environmental Arbeitstechnik and vertraut safety regulations. sind. Alle Abfallstfe sind auf geeignete Weise und entsprechend der vor Ort üblichen Gesundheits-, Sicherheits- und Umweltbestimmungen zu entsorgen (z. B. durch Autoklavieren, Desinfizieren). Anmerkung Note on use zur Benutzung translations der Übersetzungen Remarque sur l utilisation des traductions Die The elektronische electronic version Version enthält International die englische, Rules französische for Seed Testing und deutsche includes Version English, der ISTA-Vorschriften. La French version and électronique German Bei versions. irgendwelchen des règles If re inclue are Fragen any les questions versions bezüglich en on der interpretation anglais, Interpretation en français der et ISTA-Vorschriftemand. English Pour ist version die toute englische question definitive Version d interprétation die version. massgebliche des règles, Version. seule la version anglaise fait en Rules, alle- foi. Herausgegeben von der: Internationalen Éditées par : Vereinigung für Saatgutprüfung (ISTA) L Association Zürichstr. 50, 8303 Internationale Bassersdorf, d Essais Schweiz de Semences (ISTA) Zürichstr. 50, 8303 Bassersdorf, Suisse 2017 Published International by Seed Testing Association (ISTA) 2017 The International par l Association Seed Testing Internationale Association d Essais (ISTA) de Semences (ISTA) Online Zürichstr. ISSN 50, CH-8303 Bassersdorf, Switzerland Online ISSN Titel 2017 der International englischen Originalausgabe: Seed Testing Association International (ISTA) Rules for Seed Testing Titre de l édition originale anglaise : International Rules for Seed Testing Alle Online Rechte ISSN vorbehalten Kein Teil dieses Werkes darf in irgendwelcher Form oder durch Tous irgendwelchem droits réservés. Verfahren, Aucune sei es partie elektronisch, de cette mechanisch, publication ne durch peut Fotokopie être reproduite, oder Tonaufnahme All rights dans oder reserved. le système durch irgendein No part récupération anderes this publication ou Verfahren être transmise may reproduziert, be reproduced, sous aucune gespeichert stored forme in oder ou any par verbreitet retrieval aucun stockée moyen, werden, system or électronique, ohne transmitted vorherige mécanique, in any schriftliche form or photocopiant, by Genehmigung any means, enregistrant electronic, der Internationalen ou mechanical, autrement, Vereinigung photocopying, sans permission Saatgutprüfung. recording antérieure or orwise, par écrit out de l ISTA. prior permission in writing from für ISTA b-2 Effective Gültig Effectif ab 1 1. er January janvier 2017

3 Règles Internationale Internationales Rules Vorschriften for Seed pour für les Testing die Essais Prüfung de Semences von Saatgut Validierte Méthodes Chapter Methoden validées 7: Validated pour zur Gesundheitsprüfung analyse Seed sanitaire Health Testing des von semences Methods Saatgut 7 001b: 7-001b: : Malz-Agar-Methode Detection Méthode sur Alternaria malt agar für dauci den pour Nachweis la in détection Daucus von carota d Alternaria (carrot) seed dauci by malt an sur Samen agar semences method von Daucus de Daucus carota carota (Möhre) (carotte) Wirtspflanze: Host: Daucus carota Daucus L. carota L. Krankheitserreger: Pathogen(s): Alternaria Alternaria dauci dauci (J.G.Kühn) (J.G.Kühn) J.J.Groves J.J.Groves : Daucus & Skolko, syn. carota A. syn. porri L. A. f.sp. porri dauci f.sp. (J.G.Kühn) dauci (J.G.Kühn) Neerg., & Hôte Skolko, Pathogène(s) syn. Neerg., A. syn. carotae : Alternaria A. carotae (Ellis dauci (Ellis & Langlois) (J.G.Kühn) & Langlois) Stevenson J.J.Groves Stevenson & Wellman Skolko, & Wellman syn. A. porri f.sp. dauci (J.G.Kühn) Neerg., syn. A. carotae (Ellis & Langlois) Stevenson & Wellman Erstellt durch: International Seed Health Initiative for Prepared by: International Seed Health Initiative for Préparé Vegetable par : Crops, International ISF (ISHI-Veg) Seed Health Initiative for Vegetable Crops, ISF (ISHI-Veg) Vegetable Crops, ISF (ISHI-Veg) Autoren: Van Bilsen, J. 1, Cockerell, V. 2 & Roberts, S. J. Authors: 2 1 Bejo Zaden Van Bilsen, BV, PO J. Auteurs : Van Bilsen, J. 1 Box 1, Cockerell, 50, 1749 V., Cockerell, V. ZH 2 2 & Warmenhuizen, Roberts, S.J. Roberts, S.J Niederlande Bejo Bejo Zaden Zaden BV, B.V., PO P.O. Box Box 50, 50, ZH ZH Warmenhuizen, Warmenhuizen, Nerlands Pays-Bas. J.vanBilsen@bejo.nl 2 Courriel ISTA-PDC J.vanBilsen@bejo.nl 2 : J.vanBilsen@bejo.nl Method Validation Sub-committee Sous-Comité ISTA-PDC Method de Validation Validation des Méthodes Sub-committee de l ISTA-PDC Revisionsstand Revision history Version Historique 1.0, de la révision Version 1.1, 1.0, : Definition des Probenumfangs Version 1.2, 1.0, 1.1, : : Positivkontrolle Definition sample hinzugefügt; size Version Streptomycinsulfat 1.1, 1.2, : zum : Addition Définition Malzagar de hinzugefügt; positive la taille control; de deutscher l échantillon addition Name streptomycin der Wirtspflanze sulphate; hinzugefügt common name Version host 1.3, 1.2, added : : Neue Ajout Abbildungen de contrôle positif 1a, 1b; ajout Version de sulfate 1.4, 1.3, : : de streptomycine Berichterstattung New figures ; ajout de 1a, nom 1bder commun Ergebnisse l hôte überarbeitet 1.4, : Reporting results revised de Version Version 1.3, : Nouvelles figures 1a, 1b Version 1.4, : «Indications des résultats» révisé Background Hintergrund This Die Methode method ist was im Original originally zunächst published veröffentlicht in worden ISTA Handbook im Historique ISTA Handbook Seed Health Seed Testing Health in Testing November im November 1964 as S No. als S 4 3 and Nr. revised 4 und wurde in 1987 überprüft (Gambogi, Gambogi 1987). (1987). It has been Sie Cette wurde slightly méthode leicht modified a été verändert à l origine following aufgrund éditée studies von dans conducted Studien le ISTA (6 Handbook Seed 11 Seed Health Labore), Health Testing, die Initiative von novembre der International for Vegetable 1964, S.3 Seed ncrops, o 4, He- et by Saatgutchargen, International révisée ISF alth (ISHI-Veg) Initiative en 1987 for in (Gambogi, Vegetable 1999 and ). Crops, (Van Elle ISF Bilsen. (ISHI-Veg) a été légèrement 2003) The modifiée studies und 2001 compared suite (Van Bilsen, à des blotter études 2003) and initiiert conduites malt agar wurden. par methods l International der and Studie concluded that two were equivalent. The major modifica- Seed wurden Health Filterpapier- Initiative for und Vegetable Malzagarmethode Crops, ISF (ISHI-Veg) verglichen. en Beide 1999 können et 2001 gleichermaßen (Van Bilsen, genutzt 2003). Les werden. études Die ont größte comparé Modifikation les méthodes ist, dass sur die buvard Auswertung et malt erst agar nach et ont 10 conclu Tagen tion is evaluation after 10 d incubation rar than 7 d. Note that seeds can be simultaneously tested for presence Alternaria radicina using same method (see que (ursprünglich les 2 méthodes nach 7 étaient Tagen) équivalentes. erfolgt. Beachte: La Saatgut modification kann majeure parallel auch est l évaluation auf Alternaria après radicina 10 jours mit d incubation der gleichen au Methode 7 jours. untersucht Noter werden que les semences (s. Methode peuvent 7-002b). être simultané- lieu method 7-002b). ment testées pour la présence d Alternaria radicina avec la même méthode (voir méthode 7-002a). Behandeltes Treated seed(gebeiztes) Saatgut Semences traitées Behandeltes Seed treatments (gebeiztes) may affect Saatgut performance kann die Testergebnisse this test. It beeinflussen. should only be Es performed sollte nur on unbehandeltes untreated seed. Saatgut verwendet Les werden. traitements peuvent affecter la performance de la méthode. Materials Elle ne devrait être appliquée que sur semences non traitées. Material Reference material: reference cultures or or appropriate material Referenzmaterial: Matériel Referenzkulturen oder andere geeignete Materialien Malt agar plates streptomycin sulphate: 90 mm Petri dishes, one plate per ten seeds Matériel Malzextrakt-Platten de référence mit : cultures Streptomycinsulfat: de référence ou 90 autre mm Incubator: Petrischalen; matériel approprié Operating eine Platte at 20 pro ±2 10 C, Samen equipped timer-controlled Inkubator: Boîtes de malt Temperaturbereich agar near-ultraviolet avec sulfate 20 de lights ±2 streptomycine C (NUV, ausgestattet peak : mit at 360 Timer-kontrolliertem boîtes nm, de e.g. Pétri colour stériles, number UV-Licht diamètre 08, Philips; (Maximum de 90 mm, BLB bei une Sylvania). 360 pour nm; 10 z. B. semences Farbnummer 08, Philips; BLB, Sylvania). Étuve : capable de maintenir une température de 20 ±2 C, Sample équipée de preparation proche UV contrôlés par timer (NUV, pic à Probenvorbereitung 360 nm, p. ex. couleur n o 08, Philips ; BLB, Sylvania) It is vital to exclude any possibility cross-contamination between Es ist seed entscheidend, samples. This eine Kreuzkontamination can be achieved by swabbing/ zwischen Préparation spraying verschiedenen equipment Saatgutproben de and gloved l échantillon hands zu verhindern. 70 % Dazu ethanol. sind nur The gereinigte test is carried Gerätschaften out on a zu working verwenden sample und Handschuhe essentiel as described zu tragen, d exclure in die Section toute mit 70-prozentigem possibilité de contamination International Ethanol be- 400 Il seeds est croisée Rules handelt for entre Seed wurden. les Testing échantillons de semences. Ceci peut être réalisé Der en Test essuyant wird mit ou einem pulvérisant Probenumfang les équipements von 400 avec Samen de l éthanol durchgeführt à 70 %, wie en utilisant es im Kapitel des gants der ISTA-Vorschriften test est beschrieben réalisé sur ist. un échantillon de travail de 400 Method Le semences, comme décrit dans la section des Règles ISTA. Critical control points are indicated by CCP. Methode 1. Plating Kritische Méthodes 1.1 Aseptically Kontrollpunkte place a sind maximum mit KKP gekennzeichnet. 10 seeds evenly spaced on agar surface each malt agar plate. Les 1.2 Ausplattieren Positive points critiques control (reference de contrôle material): sont indiqués Aseptically par CCP. place 1.1 Unter seeds evenly sterilen spaced Bedingungen (CCP), onto höchstens agar 10 surface Körner je 1. Platte Ensemencement an appropriate gleichmäßig number auf der Agaroberfläche malt agar plates auslegen. to obtain Positivkontrollen Disposer aseptiquement (Referenzmaterial): un maximum de Unter 10 semences sterilen reference culture, or plate a reference culture on Bedingungen bien espacées die dans Körner chaque gleichmäßig boîte de Pétri (KKP) sur la auf surface der one malt agar plate. The number plates required will Agaroberfläche du malt agar. in einer entsprechenden Anzahl von Petrischalen Contrôle positif mit Malz-Agar (matériel verteilen, de référence) um eine : Placer Referenz- les depend on level contamination positive 1.2 control seed lot. kultur semences zu de erhalten manière oder aseptique eine Referenzkultur et régulièrement auf disposées Petrischale (CCP) sur mit la Malz-Agar surface du papier ausplattieren. filtre et répéter Die Anzahl avec einer un der nombre erforderlichen approprié Petrischalen de boîtes wird pour von obtenir der Stärke la culture der de Kontamination référence, ou der déposer Positivkontrollpartie une culture de abhängen. référence sur milieu. Le nombre de boîtes requis dépend du niveau de contamination du lot de semences servant de contrôle positif. Gültig Effective Effectif ab 1 er 1. janvier January b-3

4 Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Internationale Règles Internationales Vorschriften International pour für les die Rules Essais Prüfung for de Seed von Semences Saatgut Testing Incuber Incubate Tage les bei plates boîtes 20 for ±2 pendant 10 C d unter at 1020 jours wechselnden ±2 C, à 20 ±2 C Lichtbedingungen alternance h periods inkubieren: de périodes darkness 12 h de dunkel and 12 NUV h und d obscurité light. anschließend Plates et proche- should 12 h alternating avec une 12 UV-Licht. UV. be approx. Les boîtes Platten 25 cm devraient sollten below être ungefähr environ lights 25 and 25 cm cm should unterhalb en dessous not der be Lampen des stacked. lumières stehen et ne und devraient nicht gestapelt pas être werden. empilées. 3. Parallel Repiquer Subculture eine une a Referenzkultur reference culture de culture référence auf to Malz-Agar sur a malt une boîte agar zur plate de selben malt at agar Zeit same und en même unter time temps den seeds gleichen que are plated dépôt Bedingungen and des incubate semences wie die et Probe incuber anziehen. test avec plates. les boîtes d essai. 4. Die Observer Examine Körner plates les semences mit visually, Hilfe visuellement and eines under Stereomikroskops a et stereoscopic au microscope mi- bei croscope 30-facher 30 pour at la Vergrößerung 30 croissance magnification, du auf mycélium. pilzliches for fungal Utiliser Wachstum growth. un grossissement magnification und bei pour bis l identification facher for identification Vergrößerung des conidies. conidia. Use untersuchen a Konidien Les colonies Colonies identifizieren. d Alternaria Alternaria Die dauci Kolonien dauci sont are brunes von Alternaria ou or brun dark dauci foncées sind avec braun olive-grey mycélium oder dunkel-braun aerial aérien mycelium gris-olive. mit and oliv-grauem Elles produce produisent un und pigment bilden diffusible ein ins brun Medium sur le diffundieren- milieu. Les Luftmyzel a diffusible pigment in medium. Conidiophores are simple or slightly branched (Fig. 1), arisdes conidiophores braunes Pigment. sont simples Die Konidienträger ou peu ramifiés sind (Fig. einfach 1), oder apparaissant schwach seuls verzweigt ou en (Abb. petits 1), groupes entspringen à la einzeln surface ing singly or in small groups from surface oder des semences in kleinen ou Gruppen sur le mycélium auf der Samenoberfläche aérien. Les conidies oder seed or on aerial mycelium. Conidia are usually solitary, obclavate, up to 450 µm long (including beak), aus sont dem en général Luftmyzel. isolées, Sporen forme meist de einzeln, massue, keulenförmig, jusqu à bis 450 zu 450 μm µm de lang long (inkl. (incluant Fortsatz), le bec), zunächst brun olive blass mesurant oliv-braun, pâle pale olivaceous départ im et Alter devenant braun at brunes first, werdend, becoming en vieillissant mit einem avec langen un blassen bec age, long Fortsatz, et a pâle long mesurant der pale bis beak zu jusqu à dreimal up to 3 3 fois so times lang longueur ist wie length der du eigentliche corps de body la Sporenkörper conidie (Ellis, (Ellis, 1971). (Ellis, 1971). Groups 1971). Des groupes sunken Gruppen de conidia eingesunkenedies are sometimes cachés Konidien sont visible parfois können by visibles manchmal emerging grâce an à clusters l extrémité den Büscheln ir de coni- langer leur bright long Fortsätze long bec beaks clair erkannt (Fig. 1c). werden 1c). Comparer (Abb. avec 1c). Mit le positive témoin Positivkontrolle positif. control. Noter Record vergleichen. nombre number Anzahl de semences infected infizierter infectées seeds Samen each dans pro Platte chaque plate (CCP) erfassen boîte (CCP). (KKP). Allgemeine Méthodes General methods générales Methoden Überprüfung Vérification Checking tolerances: des der tolérances Toleranz: Tolerances : Les Toleranzen provide tolérances a erlauben means fournissent eine assessing des Abschätzung, moyens wher d évaluer ob or die not si Variation la variation der du Ergebnisse in résultat results dans in eines ou or entre Testes between les oder essais tests zwischen est are suffisante sufficiently verschiedenen pour wide s assurer Tests to raise ausreichend de l exactitude about groß ist des oder accuracy résultats. nicht, um Des an results. tolérances der Genauigkeit Suitable appropriées, tolerances, der Ergeb- qui doubts peuvent which nisse zu can être zweifeln. be appliquées applied Eine to à most la Toleranztabelle, plupart direct des seed essais health die d analyse für tests, die sanitaire can meisten be found direkten directs, in peuvent Table Saatgut-Gesundheitsprüfungen 5B être Part trouvées 1 Chapter dans le 5 Tableau angewendet Partie Rules, werden 1 du or chapitre Table kann, G1 findet 5 des Miles sich Règles in (1963). Tabelle ISTA, ou 5B dans Teil la 1 5B ISTA Tableau des Kapitels G1 du 5 Miles der ISTA-Vorschriften, (1963). oder in Tabelle Reporting G1 Miles results: (1963). The result a seed health test Indication should indicate des résultats scientific : Le résultat name d un essai pathogen de qualité sanitaire and des der test semences Ergebnisse: method devrait used. Der When indiquer Ergebnisbericht reported le nom on Berichterstattung detected an scientifique einer ISTA Gesundheitsprüfung Certificate, du pathogène results détecté von are Saatgut entered et la méthode sollte under den d essai Or wissenschaftlichen Les résultats Name des sont Krankheitserregers écrits dans «Autres und déter- die Determinations. employée. The minations verwendete report» must dans Methode indicate le Bulletin enthalten. ISTA. number Bei Berichterstattung seeds tested. Le auf rapport einem ISTA-Bericht doit indiquer le sind nombre die Ergebnisse de semences unter testées. Weitere Untersuchungsergebnisse le cas d un résultat négatif einzutragen. (pathogène non détec- In case a negative result (pathogen not detected), Dans results must be reported as not detected. té), Der les Prüfbericht résultats muss doivent die être Anzahl rapportés untersuchter comme Samen «non In case a positive result, report should indicate percentage infected seeds. détecté angeben.». Dans Im Falle le cas eines d un negativen résultat positif, Ergebnisses le rapport (Krankheitserreger pourcentage nicht nachgewiesen), de semences müssen infectées. die Ergebnisse als doit indiquer le nicht nachgewiesen berichtet werden. Im Falle eines positiven Ergebnisses sollte der Prüfbericht den Prozentsatz infizierter Samen angeben. Quality Qualitätssicherung Assurance assurance qualité Specific Spezifische Formation training spécifique Ausbildung This Der Ce test Test test ne sollte should devrait nur only être von be effectué Personen performed que durchgeführt par by des persons personnes werden, who have formées trained à d identification in Erfahrungen fungal identification fongique bei der ou Identifizierung sous or under la supervision ir von direct Pil- de die been entsprechende supervision. zen personnes haben qui oder l ont unter été. der direkten Anleitung einer Person erfolgen, die die entsprechenden Kenntnisse besitzt. Critical Points critiques control points de contrôle (CCP) (CCP) Kritische Kontrollpunkte (KKP) Les Contaminants saprophytes may peuvent greatly être compete en forte compétition pathogen avec Andere le pathogène Pilze sur konkurrieren le milieu mit non A. spécifique dauci, so rendant dass der la on non-selective medium making detection laborious and difficult (Step 4). erschwert La source sein de malt kann agar (Schritt peut 4). influencer les résultats. Nachweis détection laborieuse auf dem nicht-selektiven et difficile (étape Medium 4). deutlich The malt agar source can influence results. When- Lorsqu un Die Malzagar-Quelle nouveau lot kann de malt ebenfalls agar est das utilisé, Ergebnis il est beeinflussen. de Immer, contrôler wenn sa qualité eine neue avec Charge un lot de Malz-Agar semences nécessairever a new batch malt agar is used a check on quality should be made using a reference lot a de genutzt référence wird, d un sollte niveau die Qualität de contamination des Mediums connu mit Hilfe (préparation known einer Referenzprobe infection du malt). level mit (Preparation bekanntem Infektionsniveau malt agar). getestet werden. Media Milieux and et solutions Medien und Lösungen Malt agar + streptomycine Malz-Agar + Streptomycin Malt agar (CCP):: as selon specified les instructions by manufacturer du fabricant Streptomycin Sulfate Malz-Agar de streptomycine (KKP): sulphate: nach Angaben 50 : 50 mg mg des Herstellers Streptomycinsulfat: Distilled/deionized Eau distillée/désionisée water: 50 : mg ou ml 500 ml Destilliertes/deionisiertes Wasser: 1000 oder 500 ml Préparation Preparation Herstellung 1. Peser Weigh les out ingrédients ingredients dans into a un suitable récipient autoclavable 1. Abwiegen approprié. container. der Komponenten in ein autoklavierbares 2. Gefäß; Ajouter Add 1000 erforderliche 1000 ml (ou distilled/deionized 500) Menge ml d eau nach distillée. Angaben water. des Herstel- 3. Chauffer lers Steam einwiegen. to pour dissolve. dissoudre Autoclaver (oder at à 500) 121 ml C et and destilliertes/deionisiertes p.s.i. p.s.i. pendant for min. min. Wasser 5. zufügen. Laisser Allow agar refroidir to cool l agar to approx. à environ 50 C 50 and C add et ajouter streptomycin sulphate de streptomycine durch dissolved Erhitzen dissout in suspendieren. water. dans l eau Bei Verser Pour p.s.i. ml und ml 121 de molten milieu C für agar 15 dans min into des autoklavieren. 90 boîtes mm de Petri Pétri de du 3. sulfate Malz-Agar 5. Agar 90 plates mm auf and et ungefähr laisser allow to solidifier 50 solidify C abkühlen avant at room emploi lassen temperature und à température in Wasser gelöstes ambiante (20 25 C) Streptomycinsulfat (20 25 for 24 C) h before pendant use. hinzufügen. 24 h avant utilisation. 6. Jeweils ml flüssigen Agar in 90 mm Petrischalen füllen und vor der Verwendung bei Raumtemperatur Stockage (20 25 C) 24 h fest werden lassen. Storage Les boîtes peuvent être stockées à 4 C ou à température Prepared plates may be stored at room temperature or at Lagerung ambiante pendant plus d un mois avant usage. 4 C for up to one month before use. Fertige Platten können bei Raumtemperatur oder 4 C bis zu einem Monat gelagert werden b-4 Effective Gültig Effectif ab 1 1. er January janvier 2017

5 Règles Internationale Internationales Rules Vorschriften for Seed pour für les Testing die Essais Prüfung de Semences von Saatgut Validierte Méthodes Chapter Methoden validées 7: Validated pour zur Gesundheitsprüfung analyse Seed sanitaire Health Testing des von semences Methods Saatgut a b c d Abb. Figure a a Konidien Conidies Conidia von d Alternaria dauci on sur auf simple conidiophores einfache or slightly oder simples schwach branched ou verzweigte faiblement conidiophores. Konidienträger. Single b Conidies b conidia. Einzelne simples. c Konidien. Conidia c Conidies c A. Konidien dauci d A. von dauci simple A. dauci sur or conidiophores slightly an einem branched einfachen simples conidiophores oder ou faiblement schwach borne ramifiés. b ramifiés on verzweigten a single se développant rootlet Träger initial. auf einer sur 80. une Keimwurzel. d Conidium ébauche de and 80. radicelle. simple d Konidie conidiophores. 80. und d Conidies Konidienträger et conidiophores 350. simples Gültig Effective Effectif ab 1 er 1. janvier January b-5

6 Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Internationale Règles Internationales Vorschriften International pour für les die Rules Essais Prüfung for de Seed von Semences Saatgut Testing Literaturquellen Références References Validierungsstudien Études Validation de validation reports Ellis, M. B. (1971). Dematiaceous Hyphomycetes. Commonwealth Mycological Institute, Kew, Surrey, England. 609 pp. Gambogi, P. (1987). International Seed Testing Association, Hand book on Seed Health Testing, Working Sheet No. 4 (2nd Ed.): Alternaria dauci on Daucus carota. International Seed Testing Association, Zurich, Switzerland. Miles, Miles, S. S. R. R. (1963). (1963). Hand Hand book book tolerances tolerances and and measures measures precision precision for for seed seed testing. testing. Proceedings Proceedings International Seed Testing Association, 28 (3), 525 International Seed Testing Association, 28 (3), Roberts, S. J., Phelps, K., Taylor, J. D. Ridout, M. S. Roberts, S. J., Phelps, K., Taylor, J. D. & Ridout, M. S. (1993). Design and Interpretation seed health (1993). Design and Interpretation seed health assays. In Proceedings First ISTA Plant Disease assays. In Proceedings First ISTA Plant Disease Committee Symposium on Seed Health Testing (ed. J. Committee W. Sheppard), Symposium pp , on Seed Agriculture Health Testing Canada, (ed. Ottawa, J. W. Sheppard), Canada. pp , Agriculture Canada, Ottawa, Canada. Van Bilsen, J. G. P. M. (2003). Report a comparative test on Alternaria dauci and Alternaria radicina on carrot seed. ISTA Method Validation Reports (submitted) b-6 Effective Gültig Effectif ab 1 1. er January janvier 2017